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        氫鹽水對重癥性胰腺炎肺損傷保護及機制研究

        來源:  |  發布時間:2015/8/8 9:33:54  |  瀏覽次數:

          瀘州醫學院研究生論文
           急性胰腺炎是外科常見的一種急腹癥。臨床上通常分為輕癥與重癥急性胰腺炎。重癥急性胰腺炎是臨床上病情兇險起病急、發展快、并發癥較多、預后差、病死率高的臨床危重疾病,早期就容易誘發全身炎癥反應綜合征、并發多臟器功能衰竭。急性胰腺炎相關性肺損傷(APALI)是急性胰腺炎最早出現、最常見、也是最為嚴重的并發癥之一。APALI是指急性胰腺炎時炎癥介質、細胞因子大量釋放經血循環等途徑到達肺組織, 導致肺內大量炎癥細胞浸潤、細胞信號通路過度激活,引起炎性介質級聯放大反應,從而出現頑固性低氧血癥,進而可能發展成為急性呼吸窘迫綜合征是急性胰腺炎早期主要死亡原因。
           絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)是一種能夠雙重磷酸化絲氨酸和蘇氨酸的蛋白激酶,是介導細胞內外信號轉導的重要通路,在真核細胞的細胞胞漿中普遍分布。c.Jun是絲裂原活化蛋白激酶(MAPK) 的主要成員之一,因其與機體應激反應密切相關故也被稱為應激激活蛋白激酶(SAPK),在許多應激刺激因素如細胞炎癥因子、生長因子、熱休克、活性氧(ROS)、細胞表面受體等刺激下激活且活性增強。有實驗表明在急性胰腺炎早期,肺組織中心MAPK信號通路已被激活,從而使活化蛋白-1(AP-1)激活, 活化的AP-1可使IL-1、TNF表達上調,在APALI中起重要作用。同時,目前有實驗研究證實在急性胰腺炎發病的早期氧化應激已發生,大量的氧自由基通過影響細胞內外信號轉導通路,在胰腺損傷及伴隨的局部或全身并發癥中起著至關重要的作用。因此,抗氧化治療可能是減輕急性胰腺炎病情發展治療APALI的重要手段。
           然而,理想的選擇性抗氧化劑并不容易尋找。2007年日本學者 0hsawa等發現氫氣具有選擇性抗氧化作用,可以選擇性中和毒性作用強的羥自由基和亞硝酸陰離子,而后兩者是氧化應激的重要介質。這一研究結果迅速引起眾多學者的廣泛關注,從而掀起了氫分子醫學的研究熱潮,F已證實氫氣對肝、腎、心肌、腦、小腸等器官的缺血再灌注損傷具有明顯的保護作用。新近有研究表明靜脈注射氫生理鹽水對L-精氨酸誘發的急性胰腺炎具有治療作用,但具體機制尚有待進一步明確。本實驗研究擬在建立大鼠急性胰腺炎模型的基礎上,探討靜脈注射氫飽和生理鹽水是否對急性胰腺炎及其肺損傷具有保護作用,并擬從信號通路變化方面探討其可能的作用機制,旨在為急性胰腺炎及其肺損傷的抗氧化應激治療提供新方向。
           目的:探討靜脈注射氫飽和生理鹽水對;悄懰徕c誘導的大鼠重癥急性胰腺炎相關性肺損傷是否具有保護作用并從臥取信號通路的調控探討其作用機制。方法:1.氫飽和生理鹽水的制備:利用氫氣發生器生產高壓氫氣,再將高壓氫氣通入氯化鈉溶液中達到飽和濃度即可現制現用。2.大鼠重癥急性胰腺炎相關性肺損傷模型的建立及處理: 將54只健康SD雄性大鼠隨機分成假手術組(Sham組)、模型組(SAP+NS組)和氫水處理組(SAP+H2組),各組再分成6h、12h、24h 三個時間點,每個時間點6只大鼠。Sham組大鼠開腹翻動胰腺數次后隨即關腹,不作其他處理,SAP+NS組和SAP+H2組以5%;悄懰徕c經膽胰管開口逆行注入建立模型,在建模成功后lh經尾靜脈分別注射等量的生理鹽水或氫飽和生理鹽水 (5m1/kg)。各組分別在6h、12h、24h三個時間點處死大鼠,收集血清、肺組織及胰腺組織。用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法檢測血清 IL.1含量;分光光度計法測定肺組織中髓過氧化物酶(MPO)的活性;熒光定量PCR法檢測肺組織中IL-1和TNF的mRNA的表達,Wbstem blot法檢測肺組織中信號分子蛋白的表達,用肺組織濕干重比,反映肺臟水腫程度;并對胰腺組織、肺組織進行HE染色病理學檢查。結果發現,(1)SAP+NS組和SAP+H2組血清中細胞因子含量、肺組織中TNF mRNA表達水平、肺組織中蛋白表達、肺組織濕干重比,在 6h、12h、24h各個時間點均高于對照組(P<0.05),SAP+H2組與SAP+NS組比較,SAP+H2組在各個時間點均低SAP+H2組。各種檢測結果表明,氫氣治療能對抗組織炎癥反應和減少組織病理改變。研究結果表明,1.經尾靜脈注射氫飽和生理鹽水對APALI有一定治療保護作用。2.氫飽和生理鹽水可能是通過其選擇性抗氧化作用抑制細胞信號通路激活來實現對 APALI的保護治療作用。

         

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